畜牧与动物医学论文_鸡卵泡膜细胞中膜联蛋白
文章摘要:【目的】从鸡卵泡膜细胞蛋白中筛选与膜联蛋白A2（ANXA2）相互作用的细胞蛋白并进行功能分析，为深入研究ANXA2调控鸡卵泡发育的作用机制提供理论依据。【方法】制备产蛋期鸡的卵泡膜细胞，提取卵泡膜总蛋白，分别以鸡ANXA2重组蛋白His-ANXA2和标签蛋白His为诱饵蛋白，利用His pull-down联合LC-MS/MS，从卵泡膜细胞中筛选与鸡ANXA2相互作用的细胞蛋白。运用生物信息学在线软件对筛选的互作细胞蛋白进行GO功能富集、KEGG信号通路注释和蛋白互作网络分析。【结果】通过His pull-down联合LC-MS/MS共鉴定出41个与鸡ANXA2相互作用的细胞蛋白。GO功能富集分析结果表明，这些互作细胞蛋白主要分布在细胞膜和细胞骨架，参与细胞骨架、应对刺激和翻译等生物学过程，以及连接、催化活性和核糖体结构组成等分子功能。KEGG信号通路注释分析结果表明，互作蛋白主要参与应激反应、代谢、翻译、信号转导、免疫以及蛋白质定位等通路。蛋白互作网络图分析结果发现，筛选的细胞蛋白存在复杂的相互作用，其中膜联蛋白A1（ANXA1）与烯醇化酶-1（ENO1）和ANXA2互作最明显。【结论】鸡ANXA2互作细胞蛋白主要参与细胞骨架形成、应对刺激和翻译等生物学过程，涉及应激反应、代谢、翻译、信号转导、免疫及蛋白定位等信号通路。该结论为下一步开展ANXA2参与鸡卵泡发育的调控机制研究打下了基础。
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