畜牧与动物医学论文_鸡p53 mRNA实时荧光定量PC

文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

    1.1.1 实验动物

    1.1.2 毒株

    1.1.3 主要试剂

    1.1.4 主要仪器

    1.1.5 相关引物

1.2 方法

    1.2.1 动物分组

    1.2.2 合成DNA模板

    1.2.3 目的片段扩增

    1.2.4 标准品的制备

    1.2.5 优化反应条件

    1.2.6 制作标准曲线

    1.2.7 重复性试验

    1.2.8 所建检测方法的应用

1.3 数据处理

2 结果

2.1 总RNA电泳结果

2.2 扩增目的基因

2.3 制备标准曲线

2.4 相关特异性分析

2.5 IBDV感染SPF雏鸡免疫器官中p53 mRNA表达的变化

3 讨论

文章摘要:p53肿瘤蛋白由p53基因编码,在机体内有多种作用,例如,修复损伤DNA,调控细胞周期以及细胞凋亡,能够抑制肿瘤的发生。根据已发表的鸡p53 mRNA相关基因序列设计引物,提取鸡免疫器官总RNA,通过转录、纯化、链接等步骤,以提取的重组阳性质粒为标准品进行检测,绘制标准曲线,并对其特异性进行检测,建立了鸡p53 mRNA实时荧光定量检测方法。应用该方法对雏鸡免疫器官的p53 mRNA表达量进行检测,发现传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus, IBDV）感染21日龄SPF雏鸡后,其胸腺与脾脏中p53 mRNA表达第3天显著高于相应对照雏鸡;法氏囊中p53 mRNA表达量在病毒感染后5 d～7 d显著或极显著增高。试验结果表明,此检测方法重复性好,可操作性强,可以用于相关基因的检测。

文章关键词:

作者单位: 

论文DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2021.11.005

论文分类号:S831

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