畜牧与动物医学论文_镉致鸡胚胫骨软骨发育不良
文章目录
1 材料与方法
1.1 主要仪器与试剂
1.2 实验动物和分组管理
1.3 石蜡切片和染色
1.4 超微结构观察
1.5 荧光定量PCR(qRT-PCR)
1.6 数据分析
2 结果
2.1 镉对鸡胚胫骨软骨发育的影响
2.2 镉对鸡胚胫骨软骨胶原纤维结构的影响
2.3 镉对鸡胫骨软骨标志基因mRNA表达的影响
3 讨论
文章摘要:为了研究镉对鸡胚胫骨软骨发育的影响,选取体重相近的SPF鸡胚120枚随机分为4组,每组30枚,孵化6 d后在鸡胚气室打孔,其中对照组向卵黄囊注射PBS 50μL,其他3组分别向卵黄囊注射0.05、0.1和0.2 mg/mL醋酸镉50μL,处理10 d,通过石蜡切片HE染色、阿利新蓝染色观察胫骨软骨发育情况;扫描电镜观察软骨表面结构;荧光定量PCR检测软骨细胞标志性基因ACAN、COL2A1、SOX9、COL10A1、MMP-13的表达。结果显示:0.05 mg/mL镉组胫骨软骨细胞分泌的蛋白多糖增多且细胞形态正常,而≥0.1 mg/mL镉组细胞分泌的蛋白多糖减少、细胞核固缩溶解,镉处理组软骨表面胶原纤维变得疏松,排序紊乱。0.05 mg/mL镉组与对照组相比,软骨分化前期相关因子ACAN、SOX9、COL2A1显著升高（P<0.05）,但软骨分化后期相关转录因子MMP-13、COL10A1表达水平显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）降低,≥0.1 mg/mL镉组均呈抑制作用且呈剂量依赖性。结果表明,低浓度镉（0.05 mg/mL）能促进软骨早期分化,但高浓度镉（≥0.1 mg/mL）会损伤软骨表面结构、破坏软骨细胞生理功能、抑制软骨分化,对软骨生长发育有抑制作用。
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